Описание

Цитомегаловирусная инфекция – распространенное вирусное заболевание, течение которого может быть как латентным, так и ярко выраженным. Наибольшую опасность цитомегаловирус представляет для лиц c иммунодефицитом различной природы, включая ВИЧ-инфекцию, для пациентов после трансплантации органов и тканей, для беременных женщин и для новорожденных. Внутриутробное инфицирование цитомегаловирусом часто приводит к нарушениям в развитии плода.

Цитомегаловирус мышей ведет себя очень похоже на цитомегаловирус человека, вызывая сопоставимый иммунный ответ. Поэтому изучение цитомегаловируса мышей in vivo является хорошей моделью для изучения цитомегаловирусной инфекции, ее течения и терапии.

Оборудование и материалы:

• Система молекулярной визуализации In-Vivo MS FX Pro производства Bruker (США)
• Люцефирин, 3 мг/мл

Описание эксперимента:

В экспериментах использовались мыши дикого типа (C57BL/6). Для проведения исследования распределения цитомегаловируса в организме предварительно уменьшили активность NK-клеток (естественные киллеры – гранулярные лимфоциты) путем внутрибрюшного введения очищенных антител αNK1.1 (клон PK136). Через сутки после введения антител мышей заражали 5 x 105 КОЕ mCMV-Luc. Спустя четверо суток после заражения мышам вводили 3 мг/мл люциферина, предварительно применив газовую анестезию (изофлуран). Перед началом эксперимента мыши выдерживались в состоянии покоя в течение десяти минут для лучшего распределения люциферина. Комбинирование биолюминесцентной визуализации с рентгеновским излучением позволяет выявить точную локализацию вируса в организме животного.

Результаты:

Рисунок 1. Истощение NK-клеток приводит к возрастанию вирусной нагрузки и перераспределению вируса в тканях.

(A) Репрезентативное наложение светового излучения и рентгеновского изображения.

Показаны животные с нормальным (сверху) и животные с пониженным содержанием NK-клеток (снизу).

(B) Количественная оценка общей нормированной интенсивности сигнала.

(C) Количественная оценка светоизлучающих областей.

Заключение:

Система визуализации In-Vivo MS FX Pro может успешно использоваться для анализа распределения вирусной инфекции. Кроме того, возможно изучение иммунных реакций при вирусной инфекции, а также кинетики и биораспределения вирусных инфекций в живом организме.